תוֹכֶן
במאמר זה: התבוננות ישירה בחיידקים מדידה ביו-מסה פרוצדורה על ידי turbidimetry8 הפניות
ישנן כמה דרכים למדידת צמיחת חיידקים, וחלקן קשות יותר מאחרות ליישם. הפשוטים ביותר משמשים בדרך כלל ומעניקים תוצאות מדויקות יחסית, בתנאי שהם קפדניים במהלך המדידות. הטכניקות הנפוצות ביותר הן תצפית וספירת חיידקים, מדידת ביומסה וביומסה יבשה וטורבידימטריה. במעבדת בית הספר שלך צריך להיות ציוד הדרוש לפחות לאחת משיטות אלה.
בשלבים
שיטה 1 התבונן ישירות בחיידקים
-
הכן את הציוד. בנוסף למה שנמצא בדרך כלל בכל מעבדות הביולוגיה, תזדקק לכמה פריטים ספציפיים. וודא שיש לך את כל המכשירים והמכלים בהישג ידך, כדי שלא תצטרך ללכת קדימה ואחורה בארון בו מאוחסן הציוד. חשבו מראש מה תעשו כדי לדעת מה תשתמשו בכל שלב. יהיה עליכם לדעת כמה מונחי מפתח.- השג hemacytometer. זהו להב עם חדרי ספרות המשויכים למיקרוסקופ. זהו כלי קל מאוד להתאמה ולהשתמש בו. אתה יכול למצוא כמה מספקים המתמחים בציוד לבתי ספר ומעבדות מחקר. בדרך כלל מסופק מדריך למשתמש.
- קחו מנה פטרי. זהו מיכל קטן, עגול ורדוד בו תוכלו לצפות בחיידקים.
- המונח "תרבות" מתייחס למיקרואורגניזם המופץ באופן מלאכותי כחלק מניסוי מדעי.
- "מרק התרבות" הוא המדיום בו תתפתח התרבות.
-
השתמשו בכלי הפטרי. הכניסו את החיידקים לתיבה וצפו תחת מיקרוסקופ. אתה יכול גם לשים אותו ישירות על שקופית. ואז ספר את מספר התאים החיידקיים שנמצאים. -
וודא שיש לך את הריכוז הנכון. אם יש יותר מדי חיידקים הם יחפפו ולא תוכל לספור אותם נכון. אם זה המקרה, יש לדלל את התרבות על ידי ערבוב אותה עם מעט מרק. אם יש מעט מדי התוצאה לא תהיה משמעותית. לאחר מכן עליך לסנן את המרק כדי להגדיל את הריכוז. -
ספרו את החיידקים. השלב האחרון הוא פשוט לספור. התבונן בתאי הספירה שמתחת למיקרוסקופ וציינו את מספר התאים שאתה רואה. השווה את התוצאה עם חוויות דומות אחרות.
שיטה 2 מדידת ביומסה
-
בדוק שיש לך את המכשירים הדרושים. שיטה זו איטית ליישום והיא כוללת שימוש בציוד יקר. אם אינכם שוטפים אותו, השתמשו בטכניקה אחרת. מצד שני, אם למעבדה בה אתם נמצאים הכלים הנכונים, המדידה של הביומסה והמסה היבשה היא אידיאלית מכיוון שהיא נותנת תוצאות מדויקות. אתה צריך:- תנור הידראולי לכיבוי מאולץ,
- מחבת שקילה מאלומיניום,
- כמה צלוחיות ארלנמאייר,
- צנטריפוגה או מערכת סינון מעבדה.
-
בדוק שהיבול נמצא בבקבוק Erlenmeyer. אם זה לא המקרה, שפכו אותו פנימה. בשלב זה של הניסוי, החיידקים עדיין נמצאים במרק התרבות. הם יופרדו בהמשך. -
יבש את תבנית השקילה. לשם כך מכניסים לתנור. אתה יכול גם להשתמש במסנן קרום אצטט תאית בקוטר 47 מ"מ עם נקבוביות 0.45 מיקרומטר. לא משנה מה הכלי המשמש, יש למדוד את המסה שלו במדויק, כך שניתן יהיה להוריד מהתוצאות שתקבלו כאשר היבול מונח עליו. -
מיקס. תסיס את lerlenmeyer כך שהתרבות תהיה הומוגנית. אכן, בגלל כוח המשיכה, התאים נוטים באופן טבעי ליפול לתחתית המכולה. אז אתה צריך לנער מעט שעבורו מופצים בצורה אחידה ושהמדגם שלך ייצוגי יותר. -
צנטריפוגה. בעזרת הצנטריפוגה, הפרד את החיידקים ממרק התרבות. מכשיר זה משמש להפניית המכולה ומשקל נגד במהירות גבוהה מאוד. המרק זורם, השומר רק על חומר חי. למידע נוסף תוכלו למצוא מידע כיצד להשתמש בצנטריפוגה באינטרנט. -
קבל את הבצק. זרוק אותו על תבנית השקילה. אתה יכול לזרוק את מרק התרבות, לא תצטרך אותו יותר, אבל המשך את lerlenmeyer על היד. -
שוטפים את הצנטריפוגה. שופכים את מי השטיפה על תבנית השקילה בנוסף לתאי החיידק. התוצאה המתקבלת לכל דבר מעניקה לך ביומסה. -
מצא את המסה היבשה. בכדי לדעת מה הביומסה המייבשת של הדגימה שלך, הכנס את תבנית השקילה לתנור שנקבע על 100 מעלות צלזיוס למשך 6 עד 24 שעות, בהתאם להוראות המצורפות למכשיר שלך. יש להקפיד לא לעלות על טמפרטורה זו כדי להימנע משריפת חיידקים. ואז שקלו הכל ואז גררו את מסת המגש.
שיטה 3 המשך באמצעות טורבידימטריה
-
הכן את הציוד שלך. תזדקק למקור אור וספקטרופוטומטר, מכשיר שנמצא ברוב מעבדות המדע. עיין במדריך למשתמש שסופק מכיוון שלכל דגם יש פעולה משלו. שיטה זו היא אחת מהנפוצות ביותר למדידת צמיחת חיידקים, מכיוון שהיא דורשת כלים זולים ונוחים לשימוש בלבד. -
להכניס אור לתרבות. עכירות משמשת להערכת התוכן של נוזל בחלקיקים, זה מסתכם בכדי לקבוע אם הוא פחות או יותר מעונן. התוצאה שתקבל ממדידה זו תינתן ביחידות NTU (או יחידות עכירות נפלומטרית). יתכן שיהיה צורך לבצע כיול של המכשיר על מנת למדוד במדויק את עכירות המדגם. -
רשמו הערות. עכירות היא כמות החיידקים שבדגימה. הספקטרופוטומטר יאפשר לכם גם לדעת את העברת התמיסה (% T), שערכה הוא ביחס הפוך לערך של עכירות. ואז השווה את התוצאות שהתקבלו בדגימות שונות למדידת צמיחת חיידקים.